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小鼠補(bǔ)體受體2(CR2)ELISA試劑盒
最近更新時(shí)間:2012-9-5
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產(chǎn)品類(lèi)型:
ELISA試劑盒
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠補(bǔ)體受體2(CR2)ELISA試劑盒
別名:EBVRP11-78B10.1,C3DR,CD21,SLEB9的受體補(bǔ)體C3d受體補(bǔ)體受體2型
代碼:CSB-EL005934MO
大?。?6T
種類(lèi):鼠標(biāo)
目標(biāo)名稱(chēng):補(bǔ)體成分(3d/EpsteinBarr病毒)受體2
縮寫(xiě):CR2
蛋白質(zhì)生物過(guò)程:補(bǔ)充
蛋白質(zhì)生物過(guò)程:補(bǔ)體途徑
檢測(cè)時(shí)間:1-5H
樣品體積:50-100ul
檢測(cè)wavelengt:450nm處
原理:此法采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù)。特異性抗體的CR2已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和CR2目前任何的約束,固定化的抗體。*共軛的特異性的抗體的CR2除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后,加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的洗滌后,加入到孔中。經(jīng)過(guò)洗滌,以除去任何未結(jié)合的抗*蛋白的酶試劑,底物溶液加入到孔中,顯色成比例的量的初始步驟中的約束的CR2。彩色顯影被停止并測(cè)量的顏色的強(qiáng)度。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
80pmol/L 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
40pmol/L 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20pmol/L 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10pmol/L 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5pmol/L 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
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