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大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒技術(shù)支持

閱讀:860發(fā)布時間:2013-07-31

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大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140水平。用純化的大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α顆粒膜蛋白(GMP-140),再與HRP標記的α顆粒膜蛋白(GMP-140抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α顆粒膜蛋白(GMP-140呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140濃度。

大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒

操作步驟

1.         標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

20μg/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
10μg/L
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
5μg/L
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.5μg/L
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.25μg/L
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.         加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

大鼠α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:

Anti-CTn1(Cardiac troponin 1)  心肌肌鈣蛋白抗體
Anti-CT-1/CTF1(Cardiotrophln 1)  心肌營養(yǎng)素1抗體
Anti-CA I(Carbonic anhydrase I)  碳酸酐酶1抗體
Anti-CTNNAL1(catenin(cadherin-associated protein)alpha-like1)  粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體
Anti-CA Ⅱ(Carbonic anhydrase Ⅱ)  碳酸酐酶2抗體
Anti-CAS (Cellular Apoptosis Susceptibility)  細胞凋亡敏感性基因
Anti-Caspase-1 (ICE/CASP-1/P45)  天冬氨酸-*特異性蛋白酶家族抗體
Anti-Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10抗體
Anti-Caspase-12(rat mouse)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(大、小鼠)
Anti-Caspase-12(hunman)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體(人)
Anti-Caspase-13  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體
Anti- Caspase-3(Active)/caspase-3 p17 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Anti-caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Anti-procaspase 3   半胱天冬酶-3酶原抗體
Anti-CASP4(Caspase-4)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗體
Anti-Caspase-6 (CT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)
Anti-Caspase-6 (NT)  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)
Anti-Caspase-6 (NT)mouse  半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)


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