人β１腎上腺素受體抗體實(shí)驗(yàn)步驟

【資料簡介】

本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中β１腎上腺素受體抗體含量

標(biāo)本要求
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作步驟
1. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品，*標(biāo)記的抗-IgG抗體，鏈霉親和素-HRP，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣品孔。然后在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl，在樣本反應(yīng)孔中先加入待測樣品10μl再加入樣品稀釋液40μl（樣品zui終稀釋度為5倍），蓋上封板膜，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
3. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)4次，拍干。
5. 加*標(biāo)記的抗-IgG抗體：每孔加入*標(biāo)記的抗-IgG抗體50μl（空白孔除外）。37℃溫育30分鐘
6. 洗滌：操作同4。
7. 加鏈霉親和素-HRP：每孔加入50μl的鏈酶親和素-HRP（空白孔除外），輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
8. 洗滌：操作同4。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

上?？婆d是一家專業(yè)研發(fā)，經(jīng)營生物、儀器、試劑、耗材的公司，是一家經(jīng)國家相關(guān)部門批準(zhǔn)注冊的企業(yè)。主要經(jīng)營許多*水平的高科技產(chǎn)品，包括各種試劑，ELISA試劑盒，氨基酸、分離試劑、蛋白質(zhì)、碳水化合物、植物激素、表面活性劑、緩沖液、染色液，抗生素、維生素和酶類,儀器儀表，標(biāo)準(zhǔn)對照品，實(shí)驗(yàn)試劑，試管，滴管，培養(yǎng)皿等及應(yīng)用領(lǐng)域等產(chǎn)品