藍(lán)草空氣消毒乳劑的研制及其抗菌實(shí)驗(yàn)

【資料簡介】

    隨著社會(huì)進(jìn)步和大眾生活水平的提高，人們對(duì)周圍環(huán)境空氣質(zhì)量的要求越來越高，既需要健康衛(wèi)生，又要求空氣清新，因此，保持工作和生活的環(huán)境空氣清潔、無污染，對(duì)提高人們生活質(zhì)量有重要意義，是人們共同的愿望和追求?？諝馇逍孪緦?duì)凈化空氣、消除環(huán)境異味等有重要作用。中藥消毒是近年來興起的一項(xiàng)消毒技術(shù)，具有價(jià)格低廉、無毒副作用、氣味芳香、不傷害眼睛、不刺激皮膚及呼吸道黏膜等優(yōu)點(diǎn)［1］，相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)不僅有重要的社會(huì)意義，而且有廣闊的市場前景，為此，近年來我們開展了中藥空氣清新消毒劑的研究，自行研制了一種中藥制劑——藍(lán)草空氣消毒乳劑，并對(duì)其抗菌、抗病毒作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。現(xiàn)報(bào)道如下。

    1材料

    篩選出適合空氣消毒的中藥材：*（RadixIsatidis）為十字花科植物松藍(lán)IsatisindigoticaFort的干燥根；金銀花為忍冬科植物忍冬LonicarejaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花；連翹為木犀科植物連翹ForsythiaSuspensa（Thunb.）Vahl的干燥果實(shí)；百部為百部科植物直立百部Stemonasessilifolia（Miq.）Miq.，蔓生百部S.jaqonica（Bl.）Miq或?qū)θ~百部S.tuberosaLour.的干燥塊根；廣藿香Pogostemoncablin（Blanco）Benth為唇形科植物廣藿香的干燥地上部分；薄荷（HerbaMenthae）系唇形科植物薄荷的干燥地上部分；桂枝為樟科樟屬植物肉桂CinnanumcassiaPresl的干燥嫩莖；天然香料熏衣草精油（Lavandin）。以上中藥均購自寧波市藥材公司，經(jīng)鑒定符合用藥要求。

    2方法

    2.1制劑的制備

    2.1.1藥液提取及精制將薄荷、廣藿香、桂枝3味藥采用蒸餾法，提取揮發(fā)油；將金銀花、連翹、*、百部與上述藥渣混合加8倍量水，煎煮，1h/次，提取3次，合并提取液，濃縮至1g/ml，加入95%乙醇，便加邊攪拌使含醇量為70%；減壓濃縮，調(diào)pH至7.0，得濃縮液，備用。

    2.1.2乳劑的制備

    處方：①油相：硬脂酸5.0g，色拉油5.0ml，揮發(fā)油0.5ml（桂枝油0.075ml，薄荷油、藿香油各0.06ml，熏衣草油0.305ml）；②水相：三乙醇胺2.0ml，1∶1精制藥液（pH7.0）87.5ml，蒸餾水適量，溶解后定容至200ml。

    乳劑的制備：精密稱取硬脂酸5.0g，量取色拉油5.0ml，置于同一燒杯中，水浴加熱至70℃，使之熔融；另量取蒸餾水100ml，置于另一燒杯中，并向其中加入2.0ml三乙醇胺，攪拌使其溶解，水浴加熱至70℃。將油相以細(xì)流狀緩慢倒入水相中，400r/min攪拌10min，取出。待降溫至40℃時(shí)，向其中加入揮發(fā)油，300r/min攪拌至室溫即成初乳。然后向其中緩慢加入藥液87.5ml，邊加邊攪（400r/min），待藥液與初乳*混合均勻后，停止攪拌，加蒸餾水定容至200ml，即得成品乳劑（含量為0.44g/ml）。該制劑為淺棕褐色易流動(dòng)、細(xì)膩均勻、有熏衣草香氣的液體。室溫自然貯藏3個(gè)月，質(zhì)量穩(wěn)定。

    2.2實(shí)驗(yàn)室抗菌效果檢測將大腸桿菌E.coli，鏈球菌Streptococcurs，*StaphyloccousaureusRosenbach，檸檬色葡萄球菌Staphyloccouscitreus，表皮葡萄球菌Staphyloccousepidermidis標(biāo)準(zhǔn)菌株分別用肉湯稀釋，制成菌液。

    2.2.1試管法取消毒乳液一定量，加入1%氯化鈉，再加入二倍量水，加熱至沸使其破乳，置冰箱中冷卻使其分層，分取水層，加入適量（0.5%）吐溫80，制成1∶1水溶液作為樣品原液。

    校正pH至7.4～7.6，離心，分裝，高壓滅菌（8磅、15min），待涼后4℃冰箱內(nèi)保存，備用。

    試管法抗菌實(shí)驗(yàn)詳見表1。

    表1藍(lán)草空氣消毒乳抗菌實(shí)驗(yàn)（略）

    第9管不加菌作為藥液對(duì)照，第10管不加藥作為菌液生長情況對(duì)照，置37℃溫箱中培養(yǎng)24h，觀察各管生長情況。

    凡能抑制試驗(yàn)菌生長的zui高藥物稀釋度為該藥物對(duì)試驗(yàn)菌的zui低抑制濃度。然后，分別將未生長菌的培養(yǎng)液再接種于適當(dāng)?shù)沫傊桨迳?，如培養(yǎng)后重新長出試驗(yàn)菌，則說明僅有抑菌作用，如沒有細(xì)菌長出則說明該藥有殺菌作用，也可依次找出zui小殺菌濃度。結(jié)果見表2。

    表2藍(lán)草空氣消毒乳抗菌測定結(jié)果（略）

    “-”為無細(xì)菌生長；“﹢”為有細(xì)菌生長

    2.2.2紙片法①*16～18h液體培養(yǎng)物，用無菌棉簽均勻涂布于普通平板表面，稍干，以無菌鑷子取吸有一定量藥物（樣品原液）濾紙片，直徑6mm，平置于上述已接種細(xì)菌的平板表面，置37℃培養(yǎng)。次日觀察含藥紙片周圍有無抑菌圈，并測量其大小。比較（樣品原液）對(duì)試驗(yàn)菌株的抗菌作用（敏感性）。②將無菌普通平板培養(yǎng)基，放置于室內(nèi)20min，蓋上平皿放置溫箱37℃培養(yǎng)，次日觀察周圍有無抑菌圈，比較（樣品原液）對(duì)空氣當(dāng)中微生物的抗菌作用（敏感性）。

    2.3實(shí)驗(yàn)室抗病毒效果檢測將Hep-2傳代細(xì)胞，接種在96孔微量細(xì)胞培養(yǎng)板上，置于37℃培養(yǎng)箱中，長成單層，將藥品稀釋成不同濃度，加入細(xì)胞中，求出藥液對(duì)細(xì)胞的無毒界限。然后，各孔分別加入所需濃度病毒液，每一病毒稀釋度各加4孔，同時(shí)設(shè)病毒對(duì)照、細(xì)胞對(duì)照、藥物對(duì)照、陽性藥對(duì)照（抗感沖劑，國藥準(zhǔn)字：Z19993359，東北制藥集團(tuán)公司沈陽第二中藥廠生產(chǎn)，每袋10g），置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，37℃培養(yǎng)，每天在倒置顯微鏡下觀察，連續(xù)3d，記錄各孔變化情況。藍(lán)草消毒乳劑對(duì)病毒致細(xì)胞病變的作用見表3。

    表3藍(lán)草空氣消毒乳對(duì)病毒致細(xì)胞病變的作用（略）

    “﹢”為有抑制作用，“﹢-”為有延緩作用

    3結(jié)果

    3.1實(shí)驗(yàn)室抗菌檢測結(jié)果實(shí)驗(yàn)室抗菌檢測結(jié)果表明：藍(lán)草空氣消毒乳對(duì)條件致病菌及致病菌均有抑制作用。其對(duì)大腸桿菌抑菌效價(jià)為1∶16；鏈球菌抑菌效價(jià)為1∶8；*抑菌效價(jià)為1∶4；檸檬色葡萄球菌抑菌效價(jià)為1∶8；表皮葡萄球菌抑菌效價(jià)為1∶8。用紙片法試驗(yàn)顯示在*周圍有明顯的抑菌圈，對(duì)抑制環(huán)境中微生物（空氣）的作用更為理想。

    3.2實(shí)驗(yàn)室抗病毒檢測結(jié)果藍(lán)草空氣消毒乳（樣品原液）的1∶1濃度下，對(duì)流感病毒FM1株和腸道病毒ECHO11的致細(xì)胞病變分別具有抑制和延緩作用。
    4討論

    空氣是致病微生物傳播的重要途徑，據(jù)報(bào)道世界上有14種傳染病經(jīng)空氣傳播［1］。目前，用化學(xué)或物理的方法消毒還存在許多不足。中醫(yī)藥預(yù)防外邪入侵不僅有完整的理論體系，且許多中藥在體外有較強(qiáng)的抗菌抗病毒作用，特別是一些芳香化濕、清熱解毒的中藥經(jīng)現(xiàn)代藥理研究證實(shí)有廣譜抗菌作用和體內(nèi)外抗病毒作用，有一些作為天然香料的花草同時(shí)又具有抗菌抗病毒作用，這是開發(fā)和研究中藥消毒劑強(qiáng)有力的基礎(chǔ)。利用中藥藥性采用*工藝提取制成空氣消毒劑，一方面起到空氣消毒作用，另一方面中草藥的芳香可以起到提神醒腦，凈化清新空氣，滿足防病、優(yōu)化環(huán)境的要求。而且中藥安全、無毒、無刺激，更適合在人員密度大，易污染的環(huán)境中使用。因此，越來越受到人們的重視。

    從近年來的報(bào)道看，中藥空氣消毒劑的研究以殺滅細(xì)菌較多，而殺滅真菌、病毒的研究較少［2］。藍(lán)草空氣消毒乳選用金銀花、*、連翹、百部、薄荷、廣藿香、桂枝等藥，具有解表、清熱解毒、芳香化濕功效。本實(shí)驗(yàn)表明，藍(lán)草空氣消毒乳對(duì)條件致病菌及致病菌均有抑制作用，對(duì)抑制環(huán)境中微生物（空氣）的作用更為理想。對(duì)流感病毒FM1株和腸道病毒ECHO11的致細(xì)胞病變分別具有抑制和延緩作用。熏衣草香能起到避穢，掩蓋不良異味，清新空氣的作用。國外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)熏衣草香有助于改善心肌功能［3］，不僅能誘導(dǎo)放松，同時(shí)可增加覺醒水平［4］。因此，本實(shí)驗(yàn)自行研制的藍(lán)草空氣消毒乳劑有望在家庭居室、辦公室、會(huì)議室、學(xué)校教室、幼兒園、餐廳等人員密度較大的公共場所的空氣消毒和清新中發(fā)揮良好的作用。