B16鼠黑色素瘤細(xì)胞培養(yǎng)的經(jīng)驗(yàn)

【資料簡(jiǎn)介】

16鼠黑色素瘤細(xì)胞。好像這株細(xì)胞還有亞型的，不過(guò)中科院說(shuō)不清，我也就說(shuō)不清了?？傊荁16。

細(xì)胞總的來(lái)說(shuō)比較好養(yǎng)，操作基本都是常規(guī)的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培養(yǎng)，一段時(shí)間為了省錢(qián)用過(guò)新生牛也不錯(cuò)。但是傳代多了，細(xì)胞有形態(tài)改變。可以棄掉重新復(fù)蘇。血清國(guó)產(chǎn)的杭州四季青，感覺(jué)不滅活比滅活要好養(yǎng)一些。

傳代操作，主要是無(wú)菌操作。細(xì)胞增殖快非常好養(yǎng)，但是及時(shí)換液，否則也很容易死亡、或變形。消化用0.25%，可以用含EDTA的，效率更高一點(diǎn)。

消化步驟：棄血清——用D-hank's洗一遍，兩管就夠——加——鏡下觀察邊晃動(dòng)——細(xì)胞開(kāi)始變形即可——棄，不含EDTA者直接加含血清培養(yǎng)基也可——按次序吹打每個(gè)角落2-3遍——鏡下看成單細(xì)胞懸液（否則再吹）——棄去大部分（留1/4—1/8即可）——加適量培養(yǎng)基——繼續(xù)培養(yǎng)。

注意：不提倡據(jù)經(jīng)驗(yàn)按消化時(shí)間來(lái)估計(jì)是否消化*。不同情況下細(xì)胞的消化時(shí)間不同，比如：的活力、的溫度、是否含EDTA、細(xì)胞的活力、細(xì)胞的密度等等。