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ELISA檢測試劑盒的檢測速度和靈敏度
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- 【資料簡介】
ELISA檢測試劑盒試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。ELISA檢測試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。因為酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,ELISA檢測試劑盒酶標記的抗原或抗體既留存其免疫學活性,又留存酶的活性。在選購酶標儀的時候,我們會首先面臨一個選擇,濾光片還是光柵?酶標儀主要分為濾光片型和光柵型,分別以兩種不同方式生成特定波長的激發(fā)光,一種是通過濾光片,一種是通過單色器(包括光柵和棱鏡)。對于我們使用者來說,這兩種酶標儀究竟有何區(qū)別呢?
因此濾光片型酶標儀一般要比光柵型酶標儀靈敏。此外,濾光片能夠?qū)崿F(xiàn)快速的波長轉換,很適合離子通道比率分析以及雙信號快速動力學分析等。濾光片的配置決定了酶標儀所能使用的波長,我們更改實驗波長就是在切換濾光片。ELISA檢測試劑盒濾光片型酶標儀一般要比光柵型便宜一些,如果我們需要的波長比較固定,對靈敏度又有較高要求,那么濾光片型酶標儀無疑是*選擇。若是日后想要應用其他波長,還需另外購買濾光片,要是需添置的波長多就不大合算了。所以在我們出手之前一定要先想好未來可能進行的各項研究,謀定而后動。
目前市面上的光柵型酶標儀其實比濾光片型更為普遍,這是因為光柵可以靈活設置波長,就算臨時開展新研究也不用專門去買濾光片。而且如果我們要用未知染料進行檢測,或是需要自定義波長和光譜掃描,就只能選光柵型酶標儀。此外,光柵在近紫外區(qū)的檢測效率也更高(如色氨酸熒光檢測)。zui先推出光柵型酶標儀的是MD公司(Molecular Devices),ELISA檢測試劑盒MD酶標儀采用一個光柵和一個濾片濾光的單光柵系統(tǒng)。后來又出現(xiàn)了兩個光柵組成的濾光系統(tǒng),例如PE、TECAN、Thermo、BioTek等公司的一些產(chǎn)品,這類系統(tǒng)由于激發(fā)和發(fā)射各用兩個光柵也被稱為四光柵系統(tǒng)。
總的來說,如果實驗室應用很多需要多種波長,那么選擇靈活方便的光柵型酶標儀準沒錯。若是應用比較單一但對靈敏度要求高,物美價廉的濾光片型酶標儀就相當貼心。此外,還有BioTek公司的Hybrid Technology系統(tǒng),該系統(tǒng)將濾光片和單色器組合起來,想用濾光片時選濾光片,想用光柵時選光柵,就是這么簡單。
適合的才是的
不論我們買什么,適合自己的才是的,選擇酶標儀時也是如此。酶標儀性能指標包括測定波長范圍、濾光片配置、檢測速度、吸光度范圍、線性范圍、分辨率、準確度、精密度等。
對于一般生命科學實驗室來說,酶標儀主要可用于基因表達、信號傳導、ELISA、蛋白和核酸定量、細胞活性分析和免疫分析。如果要進行細胞學實驗,ELISA檢測試劑盒酶標儀一般要能夠底部讀取、微孔板掃描、并支持孵育和搖晃。而要做高通量篩選的實驗室,就需要考慮到。高通量篩選可能涉及到特殊篩選溶液、更低的檢測限以及大量微孔板。在選擇酶標儀時除了要關注可靠性、靈敏度和一致性以外,能否對微孔板所有孔進行同時檢測也是不可忽視的考量因素。
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