近二十幾年來(lái)，免疫學(xué)分析方法發(fā)展很快，特別是在使用標(biāo)記了的抗原和抗體的分析技術(shù)以后，使原來(lái)許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光（IFA）和60年代的放射免疫（RIA）分析技術(shù)之后，在70年代初期又建立了用酶來(lái)標(biāo)記抗原或抗體的分析技術(shù)。

【ELISA試劑盒原料及制造粗糙的試劑盒表現(xiàn)在】
準(zhǔn)確度不高，重復(fù)性不好。原因可能為抗體配對(duì)效果不是*，抗體識(shí)別抗原的表位容易被破壞，包被抗體或檢測(cè)抗體雜蛋白較多，沒(méi)有純化或純化效果不好，影響檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度。
客戶辯別檢測(cè)方法：
1.可采用已知濃度的重組細(xì)胞因子，稀釋到檢測(cè)范圍內(nèi)作為樣本加入，看檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
2.對(duì)用待測(cè)指標(biāo)的重組細(xì)胞因子做試劑盒說(shuō)明書(shū)上標(biāo)定的zui小濃度稀釋，可測(cè)出靈敏度，建議5個(gè)復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個(gè)復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測(cè)限。用此實(shí)驗(yàn)可驗(yàn)證出所購(gòu)試劑盒的靈敏度是否如說(shuō)明書(shū)所述，也可判斷出所購(gòu)試劑盒是否有夸大之說(shuō)。
3.選定一個(gè)檢測(cè)范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù)，可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小，此操作時(shí)需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對(duì)一些制作較粗糙的試劑盒來(lái)說(shuō)，板間CV值是較大的。
4.如果有相同指標(biāo)的進(jìn)口試劑盒，可用對(duì)方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本，分別加入各自的試劑盒做檢測(cè)，以檢測(cè)試劑盒的真實(shí)性，準(zhǔn)確性。如其中一種是的進(jìn)口試劑盒，比較可靠的話，可作為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)驗(yàn)證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。

【ELISA試劑盒檢測(cè)樣本類型的判斷】
目前ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本中，除了細(xì)胞上清外，還有比較大的一部分是血清和血漿樣本，有些試劑盒對(duì)血清和血漿樣本的檢測(cè)效果不好，表現(xiàn)在光值偏低，如RF因子存在的話，光值偏高。
購(gòu)買產(chǎn)品的實(shí)驗(yàn)者如何分辨呢？對(duì)說(shuō)明書(shū)上有說(shuō)能做血清血漿的試劑盒，如有緩沖液。建議如下：用已知濃度的待測(cè)指標(biāo)蛋白加入所測(cè)種屬的血清直接加樣和用分析緩沖液按說(shuō)明書(shū)分別加樣，得出結(jié)果如差異過(guò)大，即可得知分析緩沖液的效果如何，是否確實(shí)有作用。
對(duì)RF因子的檢測(cè)，要相對(duì)麻煩一些。需要有RF因子，添加進(jìn)去進(jìn)行比較。但對(duì)常見(jiàn)的樣本，除非有類風(fēng)濕或其它一些特殊疾病，有RF升高的情況，一般RF因子在實(shí)驗(yàn)室中的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血清和血漿檢測(cè)中可不考慮，但對(duì)人源的血清和血漿則做一做比對(duì)。

【ELISA試劑盒的選購(gòu)方法】
1.可以對(duì)常規(guī)品種的指標(biāo)，因?yàn)樾枰枯^大，所以國(guó)內(nèi)公司會(huì)用心做研發(fā)，一般做的不錯(cuò)，可以用國(guó)產(chǎn)的；對(duì)于不常用的指標(biāo)，因?yàn)橛昧可伲瑖?guó)內(nèi)公司一般不做研，所以會(huì)用國(guó)外的。國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口盒子一起用，節(jié)省經(jīng)費(fèi)而且高性價(jià)比。
2.可以咨詢?cè)摴镜募夹g(shù)人員，看看是否專業(yè)。
3.對(duì)其公司要做一個(gè)了解，對(duì)新的公司還要謹(jǐn)慎考慮。

ELISA試劑盒的一個(gè)酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十幾百個(gè)底物分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生了放大作用，使得原來(lái)極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識(shí)別出來(lái)，這種技術(shù)被稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（Enzyme-Linked  Immunosorbent  Assay，ELISA）。