氮代謝系列_谷-氨酸脫氫酶(GDH)測試盒
測定方法：微量法
產品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
GDH（EC 1.4.1.2）廣泛分布于植物中，和谷-氨酸合成酶（GOGAT）共同參與谷-氨酸的合成，在氨同化和轉化成有機氮化合物的代謝中起重要作用。
氮代謝系列_谷-氨酸脫氫酶(GDH)測試盒
測定原理：
GDH催化NH4+、α-酮戊二酸和NADH，生成谷-氨酸和NAD+，引起340nm吸光度下降。通過測定340nm吸光度的下降速率，計算GDH活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×2瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長至340nm，蒸餾水調零。
2、樣本測定
（1）在試劑二中加入10mL試劑一充分溶解混勻，置于37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴5min；現配現用（配好后12h內用完）；
（2）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和190μL試劑二，混勻，立即記錄340nm處20s時的吸光值A1和 5min20s后的吸光值A2，計算ΔA=A1-A2。
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