硝酸還原酶NR測(cè)試盒NADH速率法_氮代謝系列
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
硝酸還原酶NR測(cè)試盒NADH速率法_氮代謝系列
測(cè)定意義：
NR（ EC 1.7.1.3）廣泛存在于植物中，是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶，也是誘導(dǎo)酶，對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
測(cè)定原理：
NR 催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；NADH 在 340 nm 有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定 NADH 減少速率來(lái)表示 NR 活性。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 20mL×1 瓶，-20℃保存。
試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加 4mL 提取液溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
誘導(dǎo)劑應(yīng)用液的配制：用時(shí)將誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液稀釋 10 倍，即取 10mL 誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液加 90mL
蒸餾水，充分混勻。
動(dòng)植物組織樣品的前處理：
（1）取適量誘導(dǎo)劑于燒杯中，將新鮮標(biāo)本洗凈，濾紙吸干，放入誘導(dǎo)劑應(yīng)用液中（淹沒(méi)即可），浸泡 2h，取出樣本，濾紙吸干。
（2）按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
注意：
1、 建議使用新鮮沒(méi)有冷凍過(guò)的樣本。
2、 一般不要誘導(dǎo)處理，預(yù)測(cè)定結(jié)果沒(méi)有活性（ΔA≤0）則需要誘導(dǎo)處理。
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理：
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
環(huán)保在線