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細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是將細(xì)胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的無菌培養(yǎng)。
培養(yǎng)類型和方法
(一)成批培養(yǎng)
將細(xì)胞培養(yǎng)在一定容積的密閉容器中進(jìn)行培養(yǎng)。它是進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞分裂的生理生化研究常用的培養(yǎng)方法。
1.成批培養(yǎng)的特點(diǎn)培養(yǎng)基體積固定;必須適當(dāng)攪拌;培養(yǎng)過程中,細(xì)胞生長(zhǎng),其數(shù)目不斷發(fā)生變化,呈s增長(zhǎng);但要進(jìn)行下一批培養(yǎng),則生長(zhǎng)一定時(shí)問后,需要繼代轉(zhuǎn)移。
2.成批培養(yǎng)的方法
(1)旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)。
(2)往返震蕩培養(yǎng)。
(3)旋轉(zhuǎn)震蕩培養(yǎng)。
(4)攪動(dòng)培養(yǎng)。
(二)連續(xù)培養(yǎng)
在培養(yǎng)過程中,以不斷抽取懸浮培養(yǎng)物并注入等量新鮮培養(yǎng)基,使培養(yǎng)物不斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充,保持其恒定體積的培養(yǎng)。
1.連續(xù)培養(yǎng)的特點(diǎn)
(1)新鮮培養(yǎng)基的不斷加人,保證了養(yǎng)分的充分供應(yīng)。
(2)可使細(xì)胞保持在增殖旺盛的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期中。
(3)適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
2.連續(xù)培養(yǎng)的種類
(1)半連續(xù)培養(yǎng):每隔一定時(shí)間倒出一定量的懸浮液,同時(shí)補(bǔ)充加入等量的新鮮培養(yǎng)液。
(2)連續(xù)培養(yǎng):封閉式和開放式。
3.連續(xù)培養(yǎng)的方法
(1)濁度恒定法:這是根據(jù)懸浮液混濁度的提高來注入新鮮培養(yǎng)液的開放式連續(xù)培養(yǎng)。可以人為地選定一種細(xì)胞密度,用混濁度法控制細(xì)胞密度,此法敏感度提高。
(2)化學(xué)恒定法:這是按照某一固定速度,隨培養(yǎng)液一起加入對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)起限制作用的某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),使細(xì)胞增長(zhǎng)速率和細(xì)胞密度保持恒定的一種開放式連續(xù)培養(yǎng)法。
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