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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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大鼠α氨基丁酸受體（α-ABAR）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
2019-6-25 閱讀(132)
| 提 供 商 | 上海邦景實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 20.8KB |
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| 資料圖片 | 【點(diǎn)擊查看】 | 下載次數(shù) | 11次 |
| 資料類(lèi)型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 132次 |
大鼠α氨基丁酸受體（α-ABAR）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
本試劑盒僅供研究使用。
檢測(cè)范圍：6.0 pg/ml - 160pg/ml
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中α氨基丁酸受體（α-ABAR）含
量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠α氨基丁酸受體（α-ABAR）水平。用純
化的大鼠α氨基丁酸受體（α-ABAR）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微
孔中依次加入α氨基丁酸受體（α-ABAR），再與 HRP 標(biāo)記的α氨基丁酸受體（α-ABAR）
抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在
HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的
α氨基丁酸受體（α-ABAR）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），
通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠α氨基丁酸受體（α-ABAR）濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液
20ml×1 瓶
7 終止液
6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑
6ml×1 瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品（320pg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板
4 樣品稀釋液
5 顯色劑 A 液
6 顯色劑 B 液
標(biāo)本要求
12 孔×8 條
6ml×1 瓶
6ml×1 瓶
6ml×1/瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10 說(shuō)明書(shū)
11 封板膜
12 密封袋
1.5ml×1 瓶
1 份
2 張
1 個(gè)
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
160pg/ml
80pg/ml
40pg/ml
20pg/ml
10pg/ml
5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，
然后再加待測(cè)樣品 10µl（樣品終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié)：計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實(shí)際濃度。
