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上海博湖生物科技有限公司
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防止細胞培養(yǎng)污染建議
2022-6-28 閱讀(645)
細胞培養(yǎng)基本概述：
細胞的生長需要營養(yǎng)環(huán)境，用于維持細胞生長的營養(yǎng)基質稱為培養(yǎng)基。培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基用于大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)以及生理代謝等基本理論的研究工作。液體培養(yǎng)基中加入一定的凝固劑(如瓊脂)或固體培養(yǎng)物(如麩皮、大米等)便成為固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基為細胞的生長提供了一個營養(yǎng)及通氣的表面，在這樣一個營養(yǎng)表面上生產(chǎn)的細胞可形成單個菌落。因此，固體培養(yǎng)基在細胞的分離、鑒定、計數(shù)等方面起著相當重要的作用。從多細胞生物中分離所需要細胞和擴增獲得的細胞以及對細胞進行體外改造，觀察，必須解決細胞離體培養(yǎng)問題，同微生物細胞培養(yǎng)的難易相比，比較困難的是來自多細胞生物的單細胞培養(yǎng)，特別是動物細胞的培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)泛指所有體外培養(yǎng)，其含義是指從動物活體體內取出組織，于模擬體內生理環(huán)境等特定的體內條件下，進行孵育培養(yǎng)，使之生存并生長。細胞培養(yǎng)工作現(xiàn)已廣泛應用于生物學、醫(yī)學、新藥研發(fā)等各個領域，成為最重要的基礎科學之一。
細胞培養(yǎng)
然而，細胞培養(yǎng)過程中極易被污染，以下列舉防止細胞培養(yǎng)污染建議:
1、從培養(yǎng)箱取放細胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數(shù)。培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發(fā)后再放入，以免培養(yǎng)箱內滯留過多乙醇蒸氣。
2、操作的時候防護服、口罩、手套缺一不可。操作前，準備好所有實驗所需物品，以減少走動，物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方，同時空留足夠操作空間。
3、操作時，試劑不用盡量及時蓋上蓋子，移至操作區(qū)外圍，盡量不要從開口容器上經(jīng)過。
4、使用移液槍時，將容器傾斜以便于移液，切勿將槍桿碰觸瓶口及內壁。一旦發(fā)生倒吸情況，要及時用酒精棉球擦拭，以免液體殘留導致細菌滋生。
5、先取試劑、耗材，再取移液槍、an裝槍頭。很多人習慣先an 裝槍頭，然后去拿試劑、耗材，殊不知無意間槍頭已經(jīng)觸碰其他地方導致污染。
6、向廢液缸打廢液時，需輕柔，以免造成水花四濺，污染槍頭、槍體。實驗結束，及時倒掉廢液缸垃圾，沖洗之后噴灑酒精，放入超凈臺紫外照射殺菌。
7、凍存細胞時凍存管蓋子需擰緊。復蘇細胞時，從液氮罐取出凍存管，輕擰蓋子，以確認蓋子是否擰緊。鑷子夾住凍存管蓋子與管體交界處，在37度水浴鍋中快速解凍，水面不可超過凍存管蓋沿；不建議直接扔進水中，以免水滲入造成污染。操作過程中，對于那種模糊不清的、你不確定的有沒有污染的，寧愿認為是有菌的棄掉！也不要心存僥幸！
