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上海博湖生物科技有限公司
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ELISA試劑盒配對抗體技能方法總結(jié)
2024-2-26 閱讀(396)
ELISA試劑盒單克隆抗體制備時很多朋友會遇到這樣的問題，即咱們免疫用的蛋白為原核表達蛋白而意圖蛋白是真核蛋白或病毒等，由于沒有規(guī)范品咱們做出來的抗體沒有辦法用規(guī)范品來驗證是否與其發(fā)作反響，終究導(dǎo)致咱們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為試驗室技能總結(jié)的幾種辦法，期望對大家有所協(xié)助。
一、若要檢測的抗原為某種新的病毒
ELISA試劑盒辦法：1、很多做出該病毒某個蛋白的單克隆抗體；
2、很多收集該病毒疑似感染動物或人血液，用PCR的辦法進一步斷定每份血液是否真的有該病毒存在；
3、將你做出的很多抗體中的一個做符號作為符號抗體，其他一切抗體作為包被抗體，檢測第二步中斷定陽性的血清，成果與陰性血清做比照，并畫出點狀分布圖。若陽性血清大部分的點在陰性血清之上祝賀你找到配對抗體了；若成果相差不大，請從頭符號一株抗體做相同試驗。
二、若要檢測抗原為某一細胞因子
ELISA試劑盒辦法：1、通過超表達的辦法樹立安穩(wěn)表達的細胞系，留意要在意圖蛋白上加相應(yīng)的標(biāo)簽，以便純化。若僅僅是找到配對抗體則不需求純化甚至不需求樹立安穩(wěn)表達的細胞系瞬時轉(zhuǎn)染就可完成，若要進一步作出規(guī)范曲線請純化。
2、 將細胞系樹立后，咱們就可以拿到規(guī)范品了，做配對作業(yè)就相應(yīng)簡略。
3、若該種細胞因子可有某種陽性影響物很多影響而來，也可不做細胞系。用陽性影響物影響，咱們細胞影響物的上清液來做規(guī)范品也可。
