擬南芥ACO4的klh偶聯(lián)肽，UniProt: Q06588, TAIR: AT1G05010

主機的兔子

單克隆多克隆

親和純化血清，PBS pH = 7,4

格式凍干

量50µg

復(fù)配時，加入50µl的無菌水

儲存一旦重新組合，應(yīng)均勻使用，以避免重復(fù)凍融循環(huán)。請記住，在打開管之前，先旋轉(zhuǎn)管圈，以避免凍干材料粘附在管蓋或管邊可能造成的損失

Western blot (WB)

推薦稀釋倍數(shù)1:10 00 (WB)

預(yù)期|表觀MW 36,6 | 40 kDa

用緩沖液從本氏煙中新鮮提取總蛋白18µg/孔:Tris-HCl pH值7.5 100毫米,8 M尿素,特里同x - 100(0.2%)、Sarkosyl(0.2%)、PMSF 1毫米,抑肽素1µg / mL,亮抑酶肽(1µg / mL) NEM 2毫米Iodoacetamida 10毫米和變性4 x Laemmli樣品緩沖在95°C 5分鐘。蛋白質(zhì)樣本12% sds - page分離和涂抹1 h PVDF /硝基(孔隙大小0.2µM),用半干轉(zhuǎn)移。在TBS-T中加入3%的牛奶，攪拌1h/RT，阻斷印跡。在一抗中以1:10 00 (anti-ACO4)或1:2000 (anti-flag, Agrisera, No.)稀釋印跡孵育。AS15 3036，批號1902)，3%牛奶，TBS-T ON/4°C，攪拌(相應(yīng)膜中抗aco4和抗flag)。去除抗體溶液，RT - TBS-T中攪拌洗滌3次，共10分鐘。用Agrisera匹配的二抗(抗兔IgG馬蘿卜過氧化物酶標記AS09 602)或ECLTM過氧化物酶標記的抗小鼠抗體)稀釋至1:25 000，攪拌1h/RT。用AgriseraECLSuperBright沖洗印跡30分鐘。曝光時間為60秒。

星號表示在所有樣品中識別出的頻帶:陰性對照中均與ACO4樣品相同，而第二個頻帶不包含與帶有FLAG-tag的ACO4樣品相同MW的ACO4樣品。第二個禁令可能是本氏擬南線蟲的同源蛋白