擬南芥AUX1通過桿狀病毒感染在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)。表達(dá)由強(qiáng)多面體啟動子驅(qū)動。Sf9細(xì)胞培養(yǎng)(20ml，約;2 × 107細(xì)胞)感染病毒，MOI分別為0.1、1和2.5。3天后，取2 mL樣品，離心，4℃裂解(20 mM Tris/HCl, pH 7.4, 200 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1% Tween 20，蛋白酶抑制劑和DNAseI) 30分鐘，超聲(3 x 5 s脈沖)，然后離心。使用8 - 13%的丙烯酰胺梯度凝膠在SDS-PAGE上清樣品(全細(xì)胞裂解液)。膜轉(zhuǎn)移到PVDF后，用10%奶粉的TBS-Tween阻膜過夜。一抗在TBS-Tween中與5%奶粉按1:50 000稀釋，室溫下使用1小時，在TBS-Tween中洗滌x3個各10分鐘，二抗(如AS09 605兔抗山羊HRP偶聯(lián)抗體Agrisera)按上述1:10 000稀釋。如上所述洗滌后，用化學(xué)發(fā)光檢測試劑ECL顯影，顯影2分鐘，ImageQuant采集圖像。作為陰性對照，將未感染細(xì)胞(NC)樣本與AUX1提取物以及蛋白大小標(biāo)記物(Mr)一起檢測。

在接近60kda處檢測到完整的融合蛋白(增強(qiáng)的GFP-AtAUX1)，在略高于40kda處也檢測到斷裂或截?cái)鄺l帶。