Y1HGold菌株是Clontech公司開(kāi)發(fā)的GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)用菌株,MATa型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行篩庫(kù)試驗(yàn)Transformation marker 為:ura3,leu2;報(bào)告基因?yàn)?AbAr Y1HGold GAL4-AbA 酵母單雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用:DAbAi和PGADT7.質(zhì)粒DAbAi的篩選標(biāo)志為 URA,用于表達(dá)pBait-AbAi construct(1~3個(gè)bait DNA序列重復(fù)串聯(lián)后克隆到pAbAi中);質(zhì)粒 pGADT7的篩選標(biāo)志為 LEU,用于表達(dá)AD(GAL4C端768~881位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Prey)的融合蛋白.GAL4-AbA 酵母單雜系統(tǒng)原理:Aureobasidin A(AbA)是一種環(huán)酯肽抗生素,在低濃度(0.1-

0.2ug/ml)下即可對(duì)酵母產(chǎn)生毒性?；蚪M中整合了 pBait-AbAi的酵母菌株(Bait-Reporter Yeast Strains),當(dāng)獵物蛋白(Prey)結(jié)合到誘餌序列(Bait DNA)上，GAL4 AD 就會(huì)激活 AbAr的表達(dá),從而能夠在含有抗生素 AbA 的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。AbAr與營(yíng)養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比具有更低背景的優(yōu)點(diǎn),可以降低酵母單雜假陽(yáng)性發(fā)生的概率。