蛋白激酶G(PKG),又稱為cGMP依賴性蛋白激酶,是一種由cGMP激活的Serine/Threonine特異性蛋白激酶。
功能與特性
激活機制:PKG是第二信使分子cGMP的主要受體之一。當cGMP與PKG的調節(jié)結構域結合時,會引起構象變化,從而釋放N末端結構域對催化核心的抑制,允許底物蛋白中的Serine/Threonine殘基磷酸化。
生物活性:
平滑肌松弛:PKG在平滑肌組織中促進鈣激活鉀通道的開放,導致細胞超極化和松弛,并阻斷磷脂酶C的激動劑活性,減少三磷酸肌醇釋放儲存的鈣離子。
細胞增殖與凋亡:在許多(但不是全部)細胞類型中,激活的PKG會抑制細胞增殖和/或誘導細胞凋亡。
其他功能:PKG還參與血小板功能、精子代謝、細胞分裂和核酸合成的調節(jié)。
基因與表達:已在哺乳動物中鑒定出兩種PKG基因,編碼PKG I型(PKG-I)和II型(PKG-II)。PKG-I主要位于細胞質中,而PKG-II通過N末端肉豆蔻?;^定在質膜上。兩者在不同的細胞類型中表達,具有不同的生物學作用。
結構特征
PKG的每個亞基由三個功能域組成:
N末端結構域:介導同二聚化、抑制激酶活性以及與其他蛋白質的相互作用。
調節(jié)域:包含兩個不相同的cGMP結合位點,以高親和力和低親和力結合cGMP。
激酶結構域:催化磷酸鹽從ATP轉移至靶蛋白Serine/Threonine側鏈羥基的反應。
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)是一種基于抗原與抗體特異性反應的檢測方法。它利用抗體能夠特異性地結合抗原的特性,通過一系列的反應步驟,如抗體包被、抗原結合、酶標抗體反應和底物顯色等,實現對目標抗原或抗體的定量檢測。ELISA具有靈敏度高、特異性強、操作簡便等優(yōu)點,被廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷中。