呈現(xiàn)的溶劑峰復(fù)雜，3.2提取溶媒的選擇根據(jù)*質(zhì)量規(guī)范（試行）首先選擇丙酮作為溶劑。得到*峰不能達(dá)到基線分離。考慮到藥液里含有乙醇，因此選擇了40%60%80%90%及無(wú)水乙醇等不同濃度的乙醇作為溶劑進(jìn)行比擬，結(jié)果是無(wú)水乙醇作為溶劑測(cè)定時(shí)得到*峰能達(dá)到基線分離，且內(nèi)標(biāo)物萘在無(wú)水乙醇中易溶解。通過(guò)系統(tǒng)研究和方法學(xué)驗(yàn)證，上述的方法與原來(lái)的方法相比較，本法具有前處理簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，為其質(zhì)量控制提供了更科學(xué)的依據(jù)。

摘要：目的建立*中有效成分*含量的氣相色譜測(cè)定法。方法：色譜條件為1909IJ-413HP-5石英毛細(xì)管色譜柱，新藥*由七葉蓮、三七、雪上一枝蒿、*等組成。氣相色譜儀條件：順序升溫，柱溫60℃，堅(jiān)持5min以每分鐘5℃的升溫速率升至100℃，堅(jiān)持2min分流比為251FID檢測(cè)器，內(nèi)標(biāo)物為萘。結(jié)果：*濃度在0.01mg/mlmg/ml范圍內(nèi)呈線性關(guān)系（r=0.9998加樣平均回收率為101.70%RSD為2.08%n=5結(jié)論：該方法前處理簡(jiǎn)單、靈敏度高、線性范圍寬、分離效果好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

對(duì)跌打損傷、肩周炎、痛風(fēng)、風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛及乳腺小葉增生等疾病有顯著療效。試行規(guī)范中，采用氣相色譜法測(cè)定*的含量，前處置方法復(fù)雜，時(shí)間長(zhǎng)等。本文進(jìn)行了*含量測(cè)定方法的再研究，結(jié)果如下。

1儀器與試藥

包括氫火焰離子化檢測(cè)器；7683全自動(dòng)進(jìn)樣器；色譜柱：1909IJ-413HP-5石英毛細(xì)管柱。*對(duì)照品（批號(hào)0728-200005由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；*（批號(hào)20040126由云南省藥物研究所制藥廠提供；所用試藥、試劑均為分析純。美國(guó)Agilent公司6890氣相色譜儀系統(tǒng)。

2方法與結(jié)果

檢測(cè)器溫度為250℃，2.1色譜條件選擇進(jìn)樣口溫度為250℃。分流比251柱溫60℃，堅(jiān)持5min以每分鐘5℃升溫速率升至100℃，堅(jiān)持2min作為測(cè)定*的系統(tǒng)條件。

分別取對(duì)照品溶液、內(nèi)標(biāo)物萘溶液、供試品溶液按1μl進(jìn)樣分析。被測(cè)組分分離效果較好，2.2系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)按2.1中的色譜條件。*達(dá)基線分離，理論板數(shù)按*峰計(jì)算大于120000

用無(wú)水乙醇稀釋至刻度；吸取1.0μl注入氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，2.3線性關(guān)系考察精密稱取*對(duì)照品57.07mg用無(wú)水乙醇定容于10ml容量瓶中.精密稱取萘內(nèi)標(biāo)物513.55mg用無(wú)水乙醇定容于50ml容量瓶中。精密量取上述對(duì)照品溶液0.2ml0.4ml0.6ml0.8ml1.0ml2.0ml并分別精密加入上述萘溶液1ml置于10ml容量瓶中。每個(gè)濃度進(jìn)樣1次。以*峰面積為縱坐標(biāo)，*濃度（mg/ml為橫坐標(biāo)，繪制規(guī)范曲線，計(jì)算得回歸方程（n=6為：Y=809.00X-1.02.r=0.9998.Y-峰面積，X樣品濃度（mg/ml

該條件下，以上結(jié)果標(biāo)明。*濃度在0.101.30mg/ml范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。

以內(nèi)標(biāo)法計(jì)算，2.4精密度實(shí)驗(yàn)取同一濃度的供試品溶液1.0μl重復(fù)進(jìn)樣8次。RSD為0.12%結(jié)果標(biāo)明此方法的精密度較好。

分別加入濃度為10.27mg/ml內(nèi)標(biāo)物萘1ml按含量測(cè)定方法分別進(jìn)行供試品溶液制備、測(cè)定，2.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批號(hào)的供試品2.5g6份。以內(nèi)標(biāo)法計(jì)算，RSD為0.49%結(jié)果標(biāo)明此方法的重復(fù)性較好。

分別于室溫012361224h后進(jìn)樣，2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取同一種濃度的供試品溶液。7次測(cè)定得到平均值為0.55mg/mlRSD為0.49%結(jié)果標(biāo)明在24h內(nèi)，供試品溶液有較好的穩(wěn)定性。

分別加入濃度為10.13mg/ml內(nèi)標(biāo)物萘1ml和一定量的*對(duì)照品溶液，2.7回收率實(shí)驗(yàn)取同一批號(hào)已知含量的供試品2.5g6份。按含量測(cè)定方法分別進(jìn)行供試品溶液制備、測(cè)定，結(jié)果標(biāo)明此方法的回收率符合要求。

該方法靈敏度高，以上方法學(xué)考察結(jié)果證明。精密度好，重現(xiàn)性及回收率變異系數(shù)均在3%以下，符合《中藥新藥研究的技術(shù)要求》中“質(zhì)量規(guī)范”局部的規(guī)定。

3討論

選擇了3個(gè)系統(tǒng)條件：1檢測(cè)器為FID柱溫為150℃；進(jìn)樣器溫度為230℃；檢測(cè)器溫度為230℃。2柱溫的初始溫度為120℃，3.1系統(tǒng)條件的選擇通過(guò)查閱資料。堅(jiān)持2min先以每分鐘2℃的升溫速率升至140℃，堅(jiān)持2min以每分鐘10℃的升溫速率升至190℃，堅(jiān)持10min分流比為2013進(jìn)樣口溫度為250℃，檢測(cè)器溫度為250℃，分流比為251柱溫為60℃，堅(jiān)持5min以每分鐘5℃的升溫速率升至100℃，堅(jiān)持2min

故采用系統(tǒng)（3作為測(cè)定*中*含量的系統(tǒng)條件。系統(tǒng)（12測(cè)定得到*峰不能達(dá)到基線分離；系統(tǒng)（3測(cè)定得到*峰與鄰近峰達(dá)到基線分離且分離度超過(guò)1.5分離效果好。