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正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
PAL（EC4. 3 1 5）廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中，是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶，與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān)，在植物正常生長發(fā)育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。
測定原理：
PAL催化L-苯bingansuan裂解為反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在290nm處有zuida吸收值，通過測定吸光值升高速率計算PAL活性。
組成：
產(chǎn)品名稱 | SH0013-50T/48S | Storage |
提取液：液體 | 60ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 40ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 3瓶 | 4℃ |
試劑三：液體 | 2.5ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
試劑二：粉劑×3瓶，4℃保存。臨用前每瓶加入4ml蒸餾水水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；
自備儀器和用品：
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
試劑名稱（μl） | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 20 | |
試劑一 | 780 | 800 |
試劑二 | 200 | 200 |
混勻，30℃ 準確水浴30min
試劑三 | 40 | 40 |
混勻，靜置10min后，290nm處記錄測定管吸光值A1和對照管吸光值A2，△A=A1-A2。
注意：對照管只要做一管
PAL活性計算：
（1） 按蛋白濃度計算
單位定義：每mg組織蛋白在每ml反應體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個酶活性單位。
PAL（U/mg prot）=ΔA×V反總÷（Cpr× V樣）÷0.1÷T =17.3×ΔA÷Cpr
（2） 按樣本鮮重計算
單位定義：每g組織每ml反應體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個酶活性單位。
PAL（U/g鮮重）＝ΔA×V反總÷(W× V樣÷V樣總)÷0.1÷T =17.3×ΔA÷W
V反總：反應體系總體積，1.04ml； V樣：加入樣本體積，0.02ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g；
