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苯bingansuan解氨酶檢測(cè)試劑盒

參   考   價(jià): ¥ 1320

訂  貨  量: ≥1支

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào):SH0014

品       牌:其他品牌

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:南京市

更新時(shí)間:2025-05-12 09:29:55瀏覽次數(shù):141

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CAS SH0014 產(chǎn)品規(guī)格 100管/96樣
級(jí)別 超純、高純
PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶,與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān),在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0014

苯bingansuan解氨酶Phenylalnine ammonialyase,PAL)檢測(cè)試劑盒(微量法100T/96S)

100管/96樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                            

測(cè)定意義:

PALEC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數(shù)微生物中,是植物體內(nèi)苯丙烷類代謝的關(guān)鍵酶,與一些重要的次生物質(zhì)如木質(zhì)素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關(guān),在植物正常生長(zhǎng)發(fā)育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。

測(cè)定原理:

PAL催化L-苯bingansuan裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在290nm處有zuida吸收值,通過測(cè)定吸光值升高速率計(jì)算PAL活性。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0014-100T/96S

Storage

提取液:液體

100ml

4℃

試劑一:液體

15ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:液體

1ml

4℃

說明書

一份

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入4ml蒸餾水充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存;

自備儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV)、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提?。?/span>

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟:

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至290nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 準(zhǔn)備96UV板一塊(非普通酶標(biāo)板,普通酶標(biāo)板只能透過可見光,不能透過紫外光,檢測(cè)波長(zhǎng)小于340nm務(wù)必使用UV板)。

3、在EP管或96UV板中按順序加入下列試劑

試劑名稱(μl

測(cè)定管

對(duì)照管

樣本

5


試劑一

145

150

試劑二

40

40

混勻,30℃ 準(zhǔn)確反應(yīng)30min

試劑三

10

10

混勻,靜置10min后, 290nm處記錄測(cè)定管吸光值A1和對(duì)照管吸光值A2,△A=A1-A2。

注意:對(duì)照管只要做一管

PAL活性計(jì)算

用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

(1) 按蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個(gè)酶活性單位。

PALU/mg prot=ΔA×V反總÷Cpr× V樣)÷0.1÷T =13.3×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計(jì)算

單位定義:每g組織在每ml反應(yīng)體系中min使290nm下吸光值變化0.1為一個(gè)酶活性單位。

PALU/g鮮重)=ΔA×V反總÷(W× V÷V樣總)÷0.1÷T =13.3×ΔA÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.2ml; V樣:加入樣本體積,0.005ml;V樣總:加入提取液體積,1 mlT:反應(yīng)時(shí)間,30 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本質(zhì)量,g

96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1) 按蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg組織蛋白在每ml反應(yīng)體系中每min使290nm下吸光值變化0.05為一個(gè)酶活性單位。

PALU/mg prot=ΔA×V反總÷V×Cpr÷0.05÷T =26.6×ΔA÷Cpr

(2) 按樣本鮮重計(jì)算

單位定義:每g組織在每ml反應(yīng)體系中每min使290nm下吸光值變化0.05為一個(gè)酶活性單位。

PALU/g鮮重)=ΔA×V反總÷(W× V÷V樣總)÷0.05÷T =26.6×ΔA÷W

V反總:反應(yīng)體系總體積,0.2ml; V樣:加入樣本體積,0.005ml;V樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應(yīng)時(shí)間,30 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,g。




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