2016 02-22

基因克隆的載體

基因克隆的本質(zhì)是使目的基因在特定的條件下得到擴增和表達，而目的基因本身無法進行復制和表達、不易進入受體細胞、不能穩(wěn)定維持，所以就必須借助于“載體”及其“寄主細胞”來實現(xiàn)。作為基因克隆的載體必須具備以下...

2016 02-19

限制性核酸內(nèi)切酶及其應用

限制性核酸內(nèi)切酶及其應用（一）限制性核酸內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)當λ(k)噬菌體侵染E.coliB時，由于其DNA中有EcoB核酸酶特異識別的堿基序列，被降解掉。而E.coliB的DNA中雖然也存在這種特異序列，...

2016 02-17

輪轉式切片機石蠟切片法

組織經(jīng)石蠟包埋后制成的蠟塊，用切片機制成切片的過程為石蠟切片法。石蠟切片法現(xiàn)使用的切片機有*、輪轉式切片機兩種。ELISA試劑盒輪轉式切片機石蠟切片法1．切片前的準備：清洗過的載玻片、毛筆、鉛筆、盛有...

2016 02-15

中樞免疫器官與外周免疫器官

根據(jù)免疫器官在免疫細胞發(fā)育成熟過程中所起的作用不同，可將它分為中樞免疫器官和外周免疫器官，前者是T細胞和B細胞發(fā)生、分化、成熟的場所，后者是T細胞和B細胞定居、增殖和接受抗原刺激產(chǎn)生特異性免疫應答的場...

2016 02-03

幾種常用的親和純化技術

串聯(lián)親和純化屬于親和純化的一種（比較了幾種常用的親和純化技術的優(yōu)缺點和常見應用領域）。zui常用的親和純化技術是免疫沉淀法，通過抗體-抗原的親和作用，“捕捉”到相互作用的蛋白。但是普通的免疫沉淀法由于...

2016 02-01

宿主感染的細菌

細菌侵入宿主機體生長繁殖并釋放毒性物質(zhì)引起不同程度的病理過程，稱為細菌的感染（bacterialinfection）或傳染。能使宿主感染的細菌為致病菌或病原菌（pathogenicbacte-rium...

2016 01-29

造血干細胞的檢測方法

1.脾克隆形成法該方法是人類認識HSCzui早的方法，主要用于評估小鼠的HSC:將小鼠的骨髓或脾細胞注射到經(jīng)放射線照射過的小鼠體內(nèi)，通過觀察CFU-S的數(shù)量和種類來推知HSC。這種方法不能用于測量人類...

2016 01-27

酵母人工染色體載體

酵母人工染色體載體酵母人工染色體載體（ＹＡＣ）是由ＣＥＮ載體發(fā)展而來的。它的主要組成如下：（１）著絲粒；（２）兩個端粒：存在于染色體的末端，使染色體正確地結束復制，防止染色體被外切酶切割；（３）復制起...

2016 01-25

培養(yǎng)基成分劃分以及物理狀態(tài)劃分

1．根據(jù)培養(yǎng)基成分劃分(1)天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基指利用動、植物或微生物體或其提取物制成的培養(yǎng)基，其成分復雜且難以確定。常用的天然有機物有牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麥芽汁、玉米粉、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁...

2016 01-22

多肽鏈的延長

核糖體是多肽鏈合成的主要場所，在大亞基和小亞基的交界面形成了3個tRNA結合位點，分別為A、P和E位點。A位點是氨基酰tRNA的結合位點，P位點是肽基酰tRNA的結合位點，E位點是脫氨基酸后的空載tR...

2016 01-20

烈性噬菌體與噬菌體的分離及效價測定

噬菌體是一種專門寄生在微生物體內(nèi)的病毒，它的頭、尾外部都有由蛋白質(zhì)組成的外殼(頭膜和尾鞘)，頭的內(nèi)部含有DNA。噬菌體的生活過程可分為對宿主的吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五個階段。噬菌體分為烈性噬菌體...

2016 01-18

骨髓細胞分離培養(yǎng)

骨髓作為主要的造血場所，可進行體外培養(yǎng)。在無菌條件下，把骨髓細胞分離出來，置于培養(yǎng)系統(tǒng)中，在合適的環(huán)境中，提供營養(yǎng)物質(zhì)，使其繼續(xù)生存或生長。通過培養(yǎng)骨髓，可見到造血干細胞不同分化階段時各種血細胞的前驅...

2016 01-15

本底及假陽性產(chǎn)生的原因分析

本底及假陽性產(chǎn)生的原因分析1.基因工程抗原與合成肽抗原的區(qū)別1.1基因工程抗原是抗原基因在質(zhì)粒載體中原核或真核表達的蛋白質(zhì)抗原，多以大腸桿菌或酵母菌為表達系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比具有以下特點：a.分...

2016 01-13

吸附柱層析法

層析法是一種物理分離方法。柱層析法是層析方法中的一個類型，分為吸附柱層析法和分配柱層析法。ELISA試劑盒吸附柱層析法是分離、純化和鑒定有機物的重要方法。它是根據(jù)混合物中各組分的分子結構和性質(zhì)（極性）...

2016 01-11

以釀酒酵母為宿主的常見載體

在一些情況下，例如需要對真核微生物的代謝途徑進行修飾，或者需要表達的真核生物蛋白需要合適的翻譯后修飾才具有生物活性時，就需要采用真核微生物表達載體。真核細胞基因表達調(diào)控要比原核細胞基因復雜得多，用于真...

2016 01-08

細胞懸浮培養(yǎng)類型和方法

細胞懸浮培養(yǎng)是將細胞懸浮在液體培養(yǎng)基中進行的無菌培養(yǎng)。培養(yǎng)類型和方法(一)成批培養(yǎng)將細胞培養(yǎng)在一定容積的密閉容器中進行培養(yǎng)。它是進行細胞生長和細胞分裂的生理生化研究常用的培養(yǎng)方法。1．成批培養(yǎng)的特點培...

2016 01-06

熒光標記原位雜交法

熒光標記原位雜交法(fluorescenceinsituhykbridizatlon，F(xiàn)ISH)是近年發(fā)展起來的非放射性標記新技術。FISH可檢測單拷貝基因、表達mRJA等；其有無毒性、快速、分辨率高...

2016 01-04

同位素法

一、同位素法51Cr釋放法(以CTL為例)51Cr釋放法是用鉻酸鈉(Na51CrO4)標記的靶細胞與致敏淋巴細胞一起培養(yǎng)，靶細胞被CTL殺滅后，51Cr即釋放到培養(yǎng)液中，測定釋放到培養(yǎng)液中51Cr的脈...

2015 12-31

胰島素對離體犢牛小腸吸收功能影響的實驗

(一)試驗原理新生哺乳動物胃腸道的生長發(fā)育非常迅速，這與初乳的攝入有關，初乳中含大量多肽類生長因子如胰島素等。本實驗通過體外犢牛小腸上皮細胞培養(yǎng)法，用細胞增殖率和葡萄糖吸收率作為細胞生長發(fā)育及功能成熟...

2015 12-28

染色體畸變的試驗方法

染色體畸變是基因突變的一種形式，通常后果比較嚴重?？捎猛庵苎馨图毎?，或人和哺乳動物體細胞系作為材料進行檢測，常用的體細胞系有中國地鼠卵巢細胞(CHO)，中國地鼠肺成纖維細胞(V79和CHL)，人胚肺...